流式细胞仪检测原理
流式细胞仪检测原理如下:流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指标。经特异荧光染色的细胞需要合适的光源照射激发才能发出荧光供收集检测。常用的光源有弧光灯和激光;激光器又以氩离子激光器为普遍,也有配和氪离子激光器或染料激光器。光源的选择主要根据被激发物质的激发光谱而定。汞灯是最常用的弧光灯,其发射光谱大部分集中于300~400nm,很适合需要用紫外光激发的场合。样品分选原理。流式细胞仪的分选功能是由细胞分选器来完成的。总的过程是:由喷嘴射出的液柱被分割成一连串的小水滴,根据选定的某个参数由逻辑电路判明是否将被分选,而后由充电电路对选定细胞液滴充电,带电液滴携带细胞通过静电场而发生偏转,落入收集器中;其它液体被当作废液抽吸掉,某些类型的仪器也有采用捕获管来进行分选的。充电电压一般选+150V,或-150V;;偏转板间的电位差为数千伏。充电电路中的充电脉冲发生器是由逻辑电路控制的,因此从参数测定经逻辑选择再到脉冲充电需要一段延迟时间,一般为数十ms。
流式细胞仪结果怎么看
问题一:流式细胞仪结果图如何看 流式细胞仪检测的都是相对荧光强度,因此一般都是用来比较两个或以上样本的荧光强度的差异。而荧光强度则是由荧光标记抗体或者其他荧光染料根据不同目的来选用的。
你可以贴一组具体的图来,我可以给你一些指导。
问题二:怎样看流式细胞仪淋巴细胞分析结果 最常见的是分析CD4, CD8亚群。 先在FSC, SSC散点图上划出淋巴细胞gate。然后在此gate基础上选取T细胞标志染色阳性的细胞群(一般是CD3)。在把CD34阳性的细胞根据CD4 和CD8染色情况形式为散点图,得到CD4+/CD8-, CD4-/CD8+, 以及双阳性的比率。如果还有其他细胞标志的染色,再进一步分析。
问题三:如何分析流式细胞仪显示的数据 (一)单参数直方图 单参数直方图是一维数据用得最多的图形显示形式,既可用于定性分析,又可用于定量分析,形同一般X-Y平面描图仪给出的曲线。根据选择放大器类型不同,横坐标可以是线性标度或对数标度。用信道来表示,实质上是所测的荧光或散射光的强度。纵坐标一般表示的是细胞的相对数。只能显示一个参数与细胞之间的关系是它的局限性。 (二)双参数直方图 双参数直方图是一种细胞数与双测量参数的图形。常见有以下三种: 1.二维点图:能够显示两个独立参数与细胞相对数之间的关系。横坐标和纵坐标分别为与细胞有关的两个独立参数,平面上每一个点表示同时具有相应坐标值的细胞存在。可以由二维点图得到两个一维直方图,但是由于兼并现象存在,二维点图的信息量要大于两个一维直方图的信息量。所谓兼并就是说多个细胞具有相同的二维坐标在图上只表现为一个点,这样对细胞点密集的地方就难于显示它的精细结构。 2.二维等高图:类似于地图上的等高线表示法。它是为了克服二维点图的不足而设置的显示方法。等高图上每一条连续曲线上具有相同的细胞相对或绝对数,即“等高”。曲线层次越高所代表的细胞数越多。一般层次所表示的细胞数间隔是相等的,因此等高线越密集则表示变化率越大,等高线越疏则表示变化平衡。 3.假三维图:是利用计算机技术对二维等高图的一种视觉直观的表现方法。它把原二维图中的隐坐标-细胞数同时显现,但参数维图可以通过旋转、倾斜等操作,以便多方位的观察“山峰”和“谷地”的结构和细节,这无疑是有助于对数据进行分析的。假三维图列表模式其实只是多参数数据文件的一种计算机存储方式,三个以上的参数数据显示是用多个直方图、二维图和假三维图来完成的。(三)三参数直方图 目前,由于计算机软件的发展,很多商品化的软件均提供三参数直方图功能,意指这一类直方图的三维坐标均为参数而非细胞数。这种立体图以点图为显示方式,同样可以作全方位旋转以便仔细观察。(四)流式细胞仪的多参数分析 当细胞标记了多色荧光在流式细胞仪上被激光激发后,所得到的荧光信号和散射信号可以根据需要组合分析以获得所需的信息,这就是流式细胞仪的多参数分析。
问题四:流式细胞术图像如何分析 那些方框叫做圈门,旁边的数字说的是门里面所占的百分比,后面那2张图是计数,右上计数的是48%那群的,下图是计数45%那个门里面的, 整张图的横坐标左边是阴性,右边是阳性
问题五:流式细胞仪检测细胞分型结果分析 你要问什么问题呢?可以具体些吗?
问题六:流式细胞仪检测图怎么看flowjo Flowjo可以读取FCS格式的文件,一般的流式细胞仪都产生这个格式的文件。把FCS文件导入Flowjo后,双击导入的文件,默认打开的是FSC,SSC 点状图,你可以根据具体的使用更换坐标,或者设定gate
问题七:根据流式细胞仪的数据,如何分析? 假设你在这个图前面的步骤都是对的,包括设置gate,单细胞的gate等等。
这两个图不具备可比性,第一个的图记录了超过1万个数据,而第二个只有2千多个。相差的很远。这是最大的错误。从现有的百分率来看,G1, G2的百分率也很接近。所以是看不出差别来的。你如果要做的是看你的实验手段是否一直细胞周期。做这个实验是不行的。必须做BrdU或者EdU加PI的双染实验。在不同时间点取对照组和实验组做,才能得出结论细胞周期是否有抑制。
这样的PI单染实验,只能得出各个周期的百分率有没有改变,就算有改变,也不能说是有抑制。至于凋亡,就更加不可靠了。这个实验的特异性非常差。
问题八:流式细胞仪结果分析,急求 你必须把你具体怎么做的都详细的写一下,光凭这个图很混乱。
你CD45和CD105都是FITC染色的,是在同一个样本吗,如果不是,为啥只有一个散点图。如果是的,那就重新做实验吧
流式细胞仪的原理是什么
原理:根据激发光的强弱,来判断细胞和染色物质的结合情况,从而得到要检测的结果。
1、将待测细胞染色后,制成单细胞悬液。
2、用一定压力将待测样品压人流动室,同时不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出,鞘液管人口方向与待测样品流成一定角度,鞘液就能够包绕着样品高速流动,组成一个圆形的流束,待测细胞在鞘液的包被下单行排列,依次通过检测区域。
3、流式细胞仪通常以激光作为发光源,经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下,产生散射光信号和荧光信号。
流式细胞仪的原理是什么
原理:根据激发光的强弱,来判断细胞和染色物质的结合情况,从而得到要检测的结果。
1、将待测细胞染色后,制成单细胞悬液。
2、用一定压力将待测样品压人流动室,同时不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出,鞘液管人口方向与待测样品流成一定角度,鞘液就能够包绕着样品高速流动,组成一个圆形的流束,待测细胞在鞘液的包被下单行排列,依次通过检测区域。
3、流式细胞仪通常以激光作为发光源,经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下,产生散射光信号和荧光信号。